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    幾種常用細胞培養配套試劑的配置

    來源: 上海邦景實業有限公司 >> 進入該公司展臺 2021/10/07 10:46:28 已瀏覽:
    導讀:幾種常用細胞培養配套試劑的配置

    幾種常用細胞培養基產品:


    ⒈ BME(basal medium eagle)基礎伊格培養基


    ⒉ MEM


    ⒊ DMEM


    ⒋ IMDM


    ⒌ RPMI-1640


    ⒍ M199


    ⒎ Mccoy's 5A


    ⒏ F10 F12 DMEM混合F12(三)幾種常用細胞培養配套試劑的配置(緩沖液、平衡鹽溶液等)


    1)、無鈣、鎂、離子溶液(1000ml)


    氯化鈉(NaCl)8g磷酸二氫鈉、(NaH2PO4H20)0.05g、氯化鉀(KCl)0.2g、碳酸氫鈉(NaHCO3)1g、檸檬酸三鈉(Na3C6H5O7,H20)1g、葡萄糖1g、加去離子水或雙蒸水至1000mL


    2)、PBS(Phosphate-Buffered saline)磷酸鹽緩沖液


    甲液:0.2mol/L磷酸氫二鈉溶液、磷酸氫二鈉(無水)28.4g、氯化鈉8.77g加去離子水或雙蒸水至1000mL


    乙液:0.2mol/L磷酸二氫鈉溶液、磷酸二氫鈉(無水)2.4g、氯化鈉8.77g加去離子水或雙蒸水至1000mL


    甲、乙液于4℃保存,使用時按表3-2示比例,配制成需pH濃度,高壓滅菌后室溫保存。


    3)、Hanks液(HBSSHank's Balanced salt solution)


    ⑴母液甲(20x)配法


    ①NaCl(A.R)160g、KCl(A.R)8g、MgSO4.7H2O(A.R)2g、MgCl.6H2O(A.R)2g依次溶于800mL雙蒸水中,前一物質溶后再加后一種。


    ②CaCl2(A.R)2.8g溶于100mL雙蒸水中,溶時不斷攪拌(此液應單配,單溶)。


    待上述兩溶液中的"溶質"全溶后,將它們混合,再用雙蒸水補至1000mL,向其中加2mL氯仿作為防腐劑,置4℃保存。


    ⑵母液乙(20×)配法


    ①Na2HPO4.12H2O(A.R)3.04g、KH2PO4(A.R)1.20g、葡萄糖(A.R)20.0g溶于800ml雙蒸水中。


    ②0.4%酚紅液0.4g酚紅放在玻璃研缽后加0.01N、NaOH11.28mL,直到全部溶解,移入100mL容量瓶中,加水至100mL,過濾,pH為7.4,4℃保存。


    待上述各"溶質"完全溶解后,用雙蒸水補至1000mL,其中加氯仿2mL作防腐劑,置40℃保存。

    (3)使用液(1×)配法


    取母液甲和母液乙各一份,加雙蒸水18份,分裝后,塞好瓶塞,掛上標志。以115℃高壓滅菌25分鐘(以免葡萄糖破壞),置室溫后4℃保存,可使用幾個月。臨用前,用7.5%NaHCO3調至需pH。


    4)、Eagle's液(EBSSEagle's Balanced salt solution)


    是一種在二氧化碳(CO2)環境中短期維持細胞活性的平衡鹽溶液,可用于細胞解離前的清洗、細胞或組織的運輸、細胞計數時稀釋、溶液的配置等。


    5)、HEPES液


    生物緩沖液,化學性質穩定,在PH7.2~7.6范圍內,比NaHCO3緩沖液的緩沖能力更強。


    6)、NaHCO3緩沖液


    常規緩沖體系的一部分,但是不穩定,易受空氣中CO2的含量而改變PH值,影響緩沖效果。



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